تاثیر حضور مقادیر متفاوت g6pd تخمک در قابلیت تکاملی جنین های حاصل از تخمک های vitrified-warmed گاوی

چکیده: یکی از مشکلاتی که تکنیک تولید جنین های آزمایشگاهی (ivep) با آن روبرو است، انتخاب تخمک با کیفیت و مناسب است. به طور معمول تخمک هایی که از فولیکول های تخمدان ‘گاو های کشتار شده از کشتارگاه جمع آوری می شود از نظر کیفیت و شایستگی تکوین با هم اختلاف دارند. یکی از این اختلاف ها در تخمک های نابالغ تولید آنزیمی به نام glucose-6-phosphate dehydrogenase (g6pdh) است و به وسیله رنگی بنامbrilliant cresyl blue (bcb) میزان این فعالیت آنزیمی سنجیده و به دو گروه bcb+ (با فعالیت آنزیمی کمترg6pdh ) و سیتوپلاسمی به رنگ آبی همچنین گروه bcb- (با فعالیت آنزیمی بیشتر g6pdh) و سیتوپلاسم بی رنگ تقسیم می کند. یکی از تکنیک هایی که در آزمایشگاه های تولید جنین به طور معمول استفاده می شود (cryopreservation) است که اجازه ذخیره طولانی مدت تخمک هایی با ارزش ژنتیکی بالا را می دهد. تخمک های جدا شده به وسیله bcb را در دو گروه انجمادی و غیر انجمادی تقسیم کرده و هر کدام از گروه ها را به دو روش ivf , paretenogensis اقدام به تولید جنین کرده و سپس نتایج حاصل از تسهیم (cleavage) و میزان تولید بلاستوسیت را ثبت کرده و سپس به وسیله رنگ آمیزی افتراقی به بررسی توده ی بلاستوسیست در جنین های جدا شده به وسیله ی تست bcb، در گروه غیر انجمادی پرداختیم. طبق نتایج حاصله میزان تسهیم در گروه bcb+ غیر انجمادی و انجمادی به روش ivf به ترتیب نسبت به گروه bcb- غیر انجمادی و انجمادی افزایش غیرمعنی داری داشته (p>0.05)، همچنین میزان تسهیم دو گروه انجمادی و غیر انجمادی تفاوت معنی داری نداشتند (p>0.05). اما نتایج حاصله میزان تولید بلاستوسیت در گروه bcb+ غیر انجمادی و انجمادی به روشivf به ترتیب نسبت به گروه bcb- غیر انجمادی و انجمادی افزایش معنی داری داشت (p<0.05). اما در تولید جنین هایparetenogensis در نتایج حاصل از تسهیم، افزایش معنی داری در گروه bcb+ غیر انجمادی نسبت به بقیه گروه ها دیده شد (p<0.05). اما تفاوت معنی داری در بین گروه های bcb+ و bcb- انجمادی دیده نمی شد (p>0.05). از طرف دیگر میزان تولید بلاستوسیت در بین تمامی گروه ها تفاوت معنی داری داشته و گروه های bcb+ انجمادی و غیر انجمادی نسبت به هم و نسبت به گروه های - bcbانجمادی و غیر انجمادی افزایش معنی داری داشت (p<0.05). همچنین نتایج حاصل از رنگ آمیزی افتراقی در گروه غیر انجمادی در بلاستوسیت های hatch شده نشان می دهد که روند تکاملی در جنین هایbcb+ بهتر بوده و این جنین ها بیشترین توده ی سلولی را داشته اند. با توجه به نتایج به دست آمده می توان گفت که استفاده از رنگ bcb به عنوان یه تست در انتخاب تخمک با کیفیت بسیار مناسب بوده و باعث افزایش راندمان تکینک های آزمایشگاهی تولید جنین به خصوص درتولید جنین با استفاده از تکنیک انجماد شیشه ای تخمک می شود. کلید واژه ها: انجماد تخمک، بلاستوسیست، رنگ آمیزی افتراقی، brilliant cresyl blue (bcb)، g6pdh